大米中硒形态分析方法的建立

【摘要】硒是人体必需的微量元素之一，对人体和动物的生长发育至关重要。硒缺乏会影响人体健康，产生一些疾病，如克山病、大骨节病等，但硒摄入过多也会造成硒中毒，因此人体对硒的摄入必须在一个限制的范围。我国有许多地区属于缺硒地区，因而硒强化显得非常重要。目前市场上有许多硒强化产品，但由于其中硒形态差异较大，这些富硒产品不一定符合人体需求，因此必须建立一套系统的硒含量与硒形态检测分析方法，以规范富硒产品市场。本研究中主要是以大米为样本，建立快速准确、简便可靠、低成本的硒含量与硒形态测定与分析技术。同时验证硒在大米中的分布并研究了叶面施硒后硒在富硒稻中的转移，为硒强化的可行性提供科学依据。主要研究结果如下：1.建立了总硒含量的测定方法（微波消解-原子荧光法）对原子荧光光度计的仪器条件进行优化，最佳测定条件：5%的盐酸为载流，20g/L硼氢化钠溶液做还原剂,光电倍增管负高压260V，灯电流50mA,原子化器高度8mm。并对微波消解及盐酸还原的条件这些前处理条件进行了优化，样品成分越复杂，消解所需的试剂也就越多，设定的程序也就越复杂，消解所需的时间也就越久。盐酸还原的加热温度必须低于120℃，所需时间大概18h左右（包括赶酸时间）。该法的仪器检出限为0.8×10-4μg/L，相对标准偏差RSD为0.4239%。富硒米粉的加标回收率为93%~94%。普通大米硒含量在80~90μg/kg，富硒大米硒含量在150~160μg/kg。其中米糠中硒含量最高，其次是稻壳与米粉。2.研究了水稻的富硒效应运用微波消解-原子荧光法测定富硒水稻植株各部位的硒含量，对水稻的富硒效应进行研究。根须中硒含量最高，米糠次之，精米粉中硒含量最低。通过叶面施硒，硒从叶面的气孔进入植株内部后，由茎进行转运进入稻谷内部，同时根部也对土壤中的硒进行吸收。对米粉中的淀粉、脂肪、蛋白质含量进行测定，同时测定各部分的硒含量，得知蛋白质含量很低但是硒却主要集中在蛋白质中。又由于米糠中蛋白含量高于精米，因此稻谷籽粒的米糠中硒含量高于精米。3.建立无机硒与有机硒的测定方法（稀酸提取-原子荧光法）由于无机态硒（SE（Ⅳ）、SE（Ⅵ））都属于水溶性物质，因此用稀盐酸进行提取，经过单因素试验与正交实验（L9（34））对提取条件进行了优化，优化后的最佳条件是：盐酸浓度为0.1mol/L，提取温度为40℃，提取时间为8h，料液比4:1。对富硒米粉进行酸提取后再上原子荧光进行硒含量测定，提取液再经过盐酸还原或者微波消解后上机测定，可分别获得SE（Ⅳ）、无机硒、可溶态总硒含量，通过差减法获得SE（Ⅵ）、有机硒、不溶态硒、可溶态有机硒的含量。利用这一方法验证了硒在富硒大米中主要是以有机态存在，SE（Ⅳ）约占总硒含量的16.21%，SE（Ⅵ）约为6.97%，有机硒约占了76.82%。4.建立有机硒化合物的测定方法（柱前衍生-HPLC法）由于有机硒主要存在于蛋白质中，因此对富硒大米进行蛋白质的提取，将大米蛋白作为底物可以增加有机硒化合物的检出机率，分析出富硒大米中的有机硒化合物。首先建立了温和的酸水解提取方法，水解条件为在10g蛋白中加入6mol/L的HCl溶液100mL，50℃恒温提取48h。其次建立了以4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯（CNBF）为衍生剂的柱前衍生-HPLC法检测有机硒化合物含量分析方法。富硒大米中的有机硒化合物主要是硒代甲硫氨酸SeMet，含量为4.122μg/g，占有机硒含量的65.29%。
【作者】蒋旭玲；
【导师】袁建；
【作者基本信息】南京财经大学，食品科学，2013，硕士
【关键词】稻米；富硒效应；硒形态；微波消解-原子荧光法；柱前衍生-HPLC；法；

【参考文献】
[1]孔德明,郭志军.海水电解次氯酸钠发生装置[J].石油化工设备.1989(02)
[2]冯彦菲.关于《血液循环》的翻译报告[D].河南科技大学,英语笔译（专业学位）,2014,硕士.
[3]房然.北京奥运会与索契冬奥会纪念钞比较研究[D].华中师范大学,运动训练,2014,硕士.
[4]杨雪.有机硅改性水性聚氨酯涂饰剂的合成与表征[D].浙江大学,化学工程,2014,硕士.
[5]石巍巍.有机场效应晶体管绝缘层表面修饰的研究[D].南京邮电大学,光学工程（专业学位）,2013,硕士.
[6]肖婧莹.跨境贸易人民币结算问题研究[D].广东外语外贸大学,世界经济,2013,硕士.
[7]王晶晶.性别观念对家务劳动时间的影响[D].华中科技大学,社会学,2013,硕士.
[8]刘洋.居住建筑能耗动态模拟研究与能耗计算软件的开发[D].天津大学,供热、供燃气、通风与空调工程,2004,硕士.
[9]赵建华.公司治理与绩效的关系研究[D].华东理工大学,会计（专业学位）,2014,硕士.
[10]李宇.西部农村988例60-75岁老年女性生殖健康认知现状及影响因素研究[D].吉林大学,社会医学与卫生事业管理,2014,硕士.
[11]郝江叶.腺苷酸环化酶Ⅲ（AC3）在非神经细胞中定位的研究[D].河北大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[12]吉根林,孙志挥.一种基于可信度最优的数量关联规则挖掘算法[J].东南大学学报(自然科学版),2001,02:31-34.
[13]吕红,胡蕾,张波,余春兰.超声辅助Hummers法制备氧化石墨的创新设计[J].广东化工,2014,16:38.
[14]胡蓉.中文Web文档倾向性自动分类研究[D].四川大学,2003.
[15]王莉娜,姜勇,罗安.有源滤波器参考电流和电网电压的同步[J].控制与决策,2002,02:187-190.
[16]史文东,张立昌,尹克敏,孙海宁.地质统计地震反演方法及其在民丰断裂带封堵中的应用研究[J].石油地球物理勘探,2002,04:407-411+432.
[17]张强.微小单操作孔胸腔镜技术治疗原发性自发性气胸[D].吉林大学,临床医学,2013,硕士.
[18]董睿智.基于HHT的微机保护算法研究及其平台开发[D].华中科技大学,电力系统及其自动化,2013,硕士.
[19]陈云.我国中小上市公司董事会结构对多元化战略影响的研究[D].浙江财经学院,会计学,2013,硕士.
[20]李向果.西兰花叶中硫代葡萄糖苷和原花青素的生物学效价评定[D].甘肃农业大学,动物营养与饲料科学,2013,硕士.
[21]张锴.湖北地区女子游泳运动员体型研究及其上装原型自动生成模型的建立[D].武汉纺织大学,服装设计与工程,2013,硕士.
[22]于娟.新非农社会中农民工日常实践及社会认同[D].复旦大学,社会学,2012,硕士.
[23]袁鹏.水侵城市土质路基地面塌陷机理的研究[D].中国矿业大学,岩土工程,2014,硕士.
[24]岳亚光.从茅盾文学奖透视当代文学评奖制度的价值取向[D].山西师范大学,文艺学,2014,硕士.
[25]唐红波.从垂直管理走向分级管理的“善治”取向[D].首都师范大学,公共管理,2014,硕士.
[26]阮涛.压缩感知遥感图像融合及分类方法研究[D].西安电子科技大学,电路与系统,2012,硕士.
[27]程军.基于多波长光源的灵活栅格光网络研究[D].重庆大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[28]王纪民.地层参数的求取[J].石油地球物理勘探,1980,01:22-35.
[29]金皓阳.基于黄金货币属性的金价变动研究[D].浙江大学,金融学,2013,硕士.
[30]刘津伸.纯XML数据库中基于索引的并行查询处理技术的研究[D].东北大学,计算机软件与理论,2011,硕士.
[31]岑彩云.交通肇事罪被害人过错对刑事责任影响若干问题研究[D].吉林大学,刑法学,2013,硕士.
[32]吴冬林.嵌入式Linux下CMMB移动电视接收系统的研究与设计[D].浙江工业大学,2012.
[33]邵杰.锚杆、锚索混用岩质边坡工程中抗力相互分析[D].重庆大学,土木工程,2014,硕士.
[34]丁利群.延长石油氟硅化工公司技术创新运行机制研究[D].西北大学,高级工商管理（EMBA）（专业学位）,2012,硕士.
[35]DanielRichardson（陈丹奇）.低频电针“足三里”对T2DM大鼠GLP-1分泌影响的实验研究[D].北京中医药大学,针灸推拿学,2013,硕士.
[36]周鹏.多车协同优化操纵理论及其应用研究[D].北京交通大学,2011.
[37]方雪敏.公共财政支持住房保障的方式与效用研究[D].浙江工业大学,2012.
[38]弭鲁芳.无穷维KAM理论在偏微分方程拟周期解的存在性中的应用[D].复旦大学,基础数学,2013,博士.
[39]王仲海.张家口市竞技体育发展现状及对策研究[D].河北师范大学,体育教学,2012,硕士.
[40]杜鹏.新课程标准下济南市小学体育教师专业素质现状研究[D].山东师范大学,体育（专业学位）,2013,硕士.
[41]吴英杰.人事选拔中传记式数据测评及效度研究[D].浙江大学,2008.
[42]郑楠.正常高值血压伴心血管危险因素者的干预性研究[D].河北医科大学,内科学（专业学位）,2013,硕士.
[43]庄兵,曾子维,李国瑞.信息挖掘技术在信息搜索中的应用[J].微型机与应用,2003,09:27-28.
[44]鲁琳.地方政府债务违约风险法律防控研究[D].西南政法大学,经济法（专业学位）,2012,硕士.
[45]徐导峰,楼康华.水泵变频调速节电改造在铁路给水所的应用[J].上海铁道科技.2003(03)
[46]宋鸣晨.湖南省桃源县虾灯舞研究[D].湖南师范大学,教育（专业学位）,2014,硕士.
[47]张彪.魏晋时期“竹林七贤”的音乐思想研究[D].沈阳师范大学,音乐学,2013,硕士.
[48]吴佳佳.石墨烯及其复合材料对溶解氧还原反应的影响[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）,2013.
[49]倪晓怿.论民事诉讼争点整理程序[D].浙江大学,法律,2012,硕士.
[50]徐冠华.实施科学数据共享增强国家科技竞争力[J].中国基础科学,2003,01:7-11.